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关于灵芝论文范文 树舌灵芝菌丝体多糖提取工艺相关论文写作参考文献

分类:专科论文 原创主题:灵芝论文 更新时间:2024-04-07

树舌灵芝菌丝体多糖提取工艺是关于灵芝方面的论文题目、论文提纲、鹿茸的功效与作用论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。

摘 要:对树舌灵芝茵丝体多糖的提取工艺进行了研究.通过单因素试验和正交试验,研究了不同的微波火力、微波时间、料液比对树舌多糖提取率的影响.结果表明,在微波火力中高火,微波时间10 min,料液比1:20 (g/mL)的条件下,多糖提取率最高,达到1.022%.

关键词:树舌灵芝;菌丝体多糖;微波辅助提取

树舌灵芝(Ganoderma applanatum)又称树舌扁灵芝、平盖灵芝等,是一种天然药物且药用价值很高.树舌灵芝的重要活性成分之一是树舌多糖,其具有提高免疫力,抗肿瘤,治疗慢性乙肝的作用.

微波是超高速电磁波的一种,其穿透作用很强,可以使植物细胞中的水分迅速升温升压,导致细胞壁穿孔,从而成分从细胞中溶出,而且由于微波电磁场的 作用,分子运动会在短时间内加剧,提取时间得到缩短,提取率得到提高.因而微波提取法具有提取效率高、选择性强,操作简便等优点.现多种天然产物的提取都采用了此法 .

本论文以树舌菌丝体为原料,利用微波的高能作用提取其胞内多糖,得到树舌多糖的最佳提取工艺,以期为树舌多糖的提取提供一种新工艺、新技术,也为树舌多糖的工业化生产提供一定的基础资料.

一、材料和方法

1.材料

(1)菌株.树舌灵芝:周口师范学院生命科学和农学学院提供.

(2)培养基.采用PDA培养基.

2.主要仪器和设备

FA2004B型电子天平,HH-1型数显恒温水浴锅Spectrumlab 2 C型分光光度计,80-2型离心沉淀器,WP800W型格兰仕微波炉,DGF30/14-ⅡA型电热鼓风干燥.

3.方法

(1)树舌灵芝菌丝体干粉的制备.将活化后的树舌菌种于25℃摇床培养4 d,按5%接种量接种至发酵培养基中,25℃恒温培养3 d后,发酵液经纱布过滤,菌体用蒸馏水洗涤数次后,在50℃烘箱中烘干至恒重,粉碎研磨即得菌丝体干粉.

(2)多糖微波提取工艺.树舌灵芝菌丝体干粉→加水→微波处理→离心去渣→醇沉→离心去上清→加水溶解→样品稀释液.

(3)多糖含量的测定(苯酚-硫酸法).

①标准曲线的绘制.吸取0.04 g/L的葡萄糖标准溶液 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL,分别置于试管中,各以蒸馏水补充至2 mL,同时吸取2 mL蒸馏水于试管中作为空白对照,分别加入6%的苯酚溶液1 mL、浓硫酸5 mL,混合均匀后静置30 min,于490 nm处测定吸光度值,以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线,如图1所示.

② 样品的测定.依次在试管中加入样品稀释液2 mL、6%的苯酚1 mL、浓硫酸5 mL,混合均匀后静置30 min,于490 nm处测定吸光度值.根据标准曲线计算样品中多糖含量(g).

(4)多糖提取率的计算.多糖提取率/%等于多糖含量(g)/样品质量(g)×100

(5)多糖提取工艺的优化.分别进行单因素试验,对比不同的微波火力、微波时间、料液比(菌丝体质量:溶剂体积)对多糖提取率的影响;在单因素的基础上采用正交试验对菌丝体多糖的提取工艺进行优化.

二、结果和分析

1.不同微波火力对多糖提取率的影响

以水为提取溶剂,在料液比1:15 (g/mL)、微波时间10 min的条件下,分别于低火、解冻、中火、中高火、高火下制取菌丝体多糖,重复3次,结果如图2所示.

由图2可知:当微波火力低于中火时,多糖提取率随火力的增加而增大,高于中火时,多糖提取率降低.原因可能是微波火力越大,单位时间内微波辐射能量越高,体系温度升高越快,从而使菌丝体在单位时间内获得的生物能量逐步增加,细胞的破裂速度加快,细胞中多糖类物质的热运动也加快,因而多糖提取率增加.而当微波火力过大,多糖结构被破坏,故提取率反而下降.因此最佳微波火力为中火.

2.不同微波时间对多糖提取率的影响

以水为提取溶剂,在料液比1:15 (g/mL)、微波火力为中火的条件下,分别处理6 min、8 min、10 min、12 min、14 min制取菌丝体多糖,重复3次,结果如图3所示.

由图3可知:多糖提取率随微波处理时间的增加而增加,微波处理时间为10 min时提取率达到最大,当微波处理时间大于10 min多糖提取率降低,原因可能是在高温长时间的提取条件下多糖链断裂所致.因此最佳微波处理时间为10 min.

3.不同料液比对多糖提取率的影响

以水为提取溶剂,分别加入5、10、15、20、25倍体积的溶剂,在微波火力为中火的条件下处理10 min,重复3次,结果如图4所示.

由图4可知:随着提取溶剂量的增加,多糖提取率不断升高,在1:15 (g/mL)时达到最大,当提取溶剂用量再增加时提取率降低.因此最佳料液比为1:15 (g/mL).

4.正交试验确定最佳提取工艺参数

(1)L9(34)正交试验设计方案

根据单因素试验结果,利用L9(34)正交试验设计方案见表1,优化树舌灵芝多糖最佳微波提取工艺参数.

由表2可知,各因素树舌菌丝体多糖提取率的影响主次顺序为:B(微波时间)>A(微波火力)>C(料液比);树舌多糖提取率的最优组合为A3B2C2,即树舌菌丝体多糖最适提取工艺参数为:微波时间为10 min,料液比为l:20 (g/mL),微波火力为中高火.

三、结论

通过单因素试验和正交试验得出树舌多糖最佳提取工艺参数为:微波时间为10 min,微波火力为中高火,料液比为1:20 (g/mL).在此条件下,菌丝体多糖提取率为1.022%.此法比传统的水提法提取率高,提取时间也大大缩短,而且适合工业化生产,但微波提取的树舌菌丝体多糖和传统方法提取的树舌菌丝体多糖在功能和结构上有何区别还需要进一步去研究.

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作者简介:刘中华(1982-),女,硕士,讲师,研究方向:食品和发酵工程的教学和研究工作.

总结:该文是关于灵芝论文范文,为你的论文写作提供相关论文资料参考。

参考文献:

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