论文某地区集约化养殖场鸡源大肠杆菌分离鉴定和耐药性分析是关于大肠杆菌方面的论文题目、论文提纲、鸡大肠杆菌病特效药论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。
摘 要 本文旨在从集约化养殖场健康鸡群中分离大肠杆菌,并对分离鉴定的大肠杆菌进行耐药性检测,结合养殖场提供的用药信息,分析耐药种类和耐药率与用药的相关性.本实验通过形态染色、培养特性、VITEK 2 Compact 微生物鉴定系统分离鉴定大肠杆菌,用微量肉汤稀释法检测分离鉴定获得的184株鸡源大肠杆菌对8类13种药物的耐药性.结果,184株鸡源大肠杆菌对阿莫西林/克拉维酸、多粘菌素耐药,阿莫西林/克拉维酸的总耐率仅达1.08%；对庆大霉素、大观霉素、强力霉素中性耐药,庆大霉素和强力霉素的总耐药率都在20%以下；对氨苄西林、恩诺沙星、氧氟沙星、复方新诺明、磺胺异噁唑、氟苯尼考、四环素等耐药率较高,复方新诺明和磺胺异噁唑的总耐药率高达80%以上.药敏试驗结果表明,耐药种类和耐药率与用药相关,饲养过程中应避免抗菌药物的不合理使用和滥用.
关键字 鸡源大肠杆菌；微量肉汤稀释法；耐药性
大肠杆菌是集约化养鸡场常见的条件性致病菌.随着抗菌药物长期广泛使用,临床分离大肠杆菌对药物的耐药率逐年升高,且呈交叉耐药和多重耐药趋势,给临床有效防控该病造成一定困难.
大肠杆菌病是在世界范围内影响养殖业发展的主要细菌病之一,常招致巨大的经济损失,有效防治大肠杆菌病一直是养殖业的一项重要课题.禽大肠杆菌病是由一些特殊血清型的致病性大肠杆菌引起的禽类急性或慢性细菌性传染病.近几年随着我国养殖业迅速发展和集约化程度的大大提高,大肠杆菌病流行势头愈加迅速.在实际生产中,鸡大肠杆菌病的发生尤为严重,常引起较高的发病率和死亡率.由于该病在一些养殖场中严重发生,兽医临床上抗菌药物不得不大量地被应用,导致大肠杆菌耐药菌株不断出现,耐药谱不断扩大,形成恶性循环；同时加剧了抗菌药物在畜禽体内的残留,给养禽业的持续发展和人类的身体健康带来潜在危害.大肠杆菌病常作为其它传染病的并发病和继发病出现,环境卫生状况不良、饲养管理不当等都会加剧该病的发生和传染.
禽大肠杆菌病潜伏期从数小时到3d不等.临床症状因感染鸡日龄不同而有差异,经卵感染或在孵化后感染的鸡胚,出壳后几天内即可发生大批量急性死亡.成年鸡感染后,多表现为关节滑膜炎、输卵管炎和腹膜炎.由鸡大肠杆菌病引起的常见病症有：急性败血症、气囊炎、关节滑膜炎、全球眼炎、输卵管炎和腹膜炎、脐炎、肉芽肿、胚胎死亡和卵黄性腹膜炎等.
大肠杆菌对外界不利因素的抵抗力不强.对高温抵抗力较弱,一般加热到60℃15min即可被杀死,在干燥环境下也容易死亡.对一般的化学消毒药品都比较敏感,如5%—10%的漂白粉、3%来苏儿、5%石碳酸等均能迅速杀死大肠杆菌.鸡大肠杆菌病除引起鸡死亡造成的直接损失外,还造成产蛋鸡产蛋率下降、鸡蛋质量下降,造成饲料利用率下降、生产能力及幼雏成活率下降.鸡大肠杆菌病虽多发生于幼雏,但日龄较大的鸡也时有发生.随着集约化程度的不断提高,鸡大肠杆菌病得流行趋势越来越明显,常常继发感染其它疾病和与其它疾病发生混合感染,使许多传染病的发病率和死亡率不断升高.随之而来的,大量的药物和疫苗使用不仅加大了大肠杆菌病造成的损失,同时,也使养殖环境陷入药物、疫苗滥用的局面.国内外的研究均认为大肠杆菌易产生耐药性,大肠杆菌的耐药性与其本身特性、耐药性质粒的传播和药物的常规使用情况等因素有关.对我国部分地区鸡源大肠杆菌药物敏感性测定结果表明,临床诊断上频繁使用某些抗生素或药物,不能在正确诊断的基础上合理使用抗菌药物是导致细菌耐药性产生的两个个普遍原因.
本实验分离到184株大肠杆菌,选择临床常用的喹诺酮类、四环素类、多粘菌素类、氨基糖苷类、头孢菌素类、氯霉素类、磺胺类、β-内酰胺类8类共13种药物,检测184株分离菌株的耐药性,通过对比临床诊断上抗生素使用情况不同的鸡源大肠杆菌的耐药性,以期为有效防治鸡大肠杆菌感染及进一步研究细菌的耐药机制提供一定的理论基础.不同地区的不同集约化养殖场,由于饲养环境和用药情况的不同,大肠杆菌的耐药性不尽相同.目前,我国关于不同地区的鸡源大肠杆菌的耐药性分析报道比较多,规模化养殖场健康鸡群相关的报道多分析饲养环境和用药情况对耐药性的影响,疑似大肠杆菌病病例的相关报道多根据分离鉴定出的致病性大肠杆菌血清型的耐药性,为临床用药提供依据.
1 实验方法
1.1大肠杆菌的分离鉴定
1.2药敏试验
1.2.1配制菌悬液
取过夜孵育的3-5个纯菌落于5ml去离子水中,在管壁上充分涂抹均匀,用比浊仪进行比浊,使菌落的浓度达到0.5麦式单位（在使用比浊仪前,先用0.5麦式单位的标准比浊管对比浊仪进行标定）,即菌落浓度约为1×108cuf/ml.
1.2.2肉汤稀释
吸取10μl菌悬液于11ml先德药敏肉汤管中,上下颠倒摇晃,用涡旋仪充分混匀,菌落浓度约为1×105cfu/ml.
1.2.3药敏板加样
在板条H1、H2两孔中各加入5μl去离子水.将先德药敏肉汤管固定在AIM（自动菌液接种系统）的药敏肉汤管固定夹上,用AIM加样.覆上透明的无孔薄膜.放入恒温培养箱中34-36℃孵育18-24h.
1.2.4读取结果
将孵育好的药敏板放入VIZION仪器,读取结果.
2 结果
2.1细菌分离情况
不同鸡场的大肠杆菌分离率有差异,但分离率都比较高,说明大肠杆菌普遍存在于鸡肠道内,易于分离,总分离率为76.67%.绿源养殖场的分离率明显低于其他抽样场地,可能因为样品保存不当造成,具体原因还需进一步考察确定.
2.2耐药性检测结果
来自6个养殖场的184株鸡源大肠杆菌对13种药物敏感试验和多重耐药性分析的结果如下表2、表3：
3 讨论
微生物耐药率不断增加的原因主要是：不合理使用和滥用,WHO对我国滥用抗菌药的评估是：中国97%的病毒性支气管感染患者使用了抗菌药；在初级医疗保健体系中30%-60%患者使用了抗菌药.
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参考文献：
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