论文基于线粒体DNACOⅠ基因鉴别畜禽肉中鸡源性成分是关于线粒体DNACO方面的论文题目、论文提纲、线粒体dna论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。
摘 要：为建立畜禽肉中鸡源性成分的快速检测方法,以线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因序列为靶点,比较羊、牛、猪、兔、鸽、鹌鹑、鸡、鸭、鹅9 种动物COⅠ基因的差异位点,设计筛选鸡特异性引物,进行常规聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）和荧光定量PCR检测.结果表明：所设计的引物仅对鸡肉DNA模板有扩增条带和典型扩增曲线,且循环阈（cycle threshold,Ct）值为21.78,对其他动物DNA模板无扩增.方法特异性较强,灵敏度较高,达pg级,可以用于畜禽肉与肉制品中鸡源性成分的快速、有效、準确检测.
关键词：鸡源性成分；线粒体DNA；COⅠ基因；荧光定量PCR
Identification of Chicken Origin Ingredients in Livestock and Poultry Meat Based on Mitochondrial DNA COI Gene
TANG Xiujun, FAN Yanfeng, GE Qinglian, JIA Xiaoxu, ZHANF Jing, LIU Yinyin, ZHANG Xiaoyan, WANG Jue, GAO Yushi*
（Institute of Poultry, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Yangzhou 225125, China）
Abstract： In this study, a quick method to identify ingredients of chicken origin in livestock and poultry meat was developed by polymerase chain reaction （PCR） and fluorescence quantitative PCR using mitochondrial DNA cytochrome C coxidase subunit Ⅰ （CO Ⅰ） gene as target gene. The mitochondrial DNA CO Ⅰ genes from chicken, duck, goose, pig, cattle, sheep, rabbit, pigeon and quail revealed distinct loci. Based on this, a set of chicken-specific primers was designed. The results showed that the designed primers could only amplify template DNA from chicken with a cycle threshold （Ct） value of 21.78. The PCR assay had a high specificity and sensitivity （at pg level） and it could be used to detect ingredients of chicken origin in livestock and poultry meat quickly and accurately.
Key words： chicken origin ingredients； mitochondrial DNA； cytochrome C coxidase subunit I （CO I） gene； fluorescence quantitative PCR
DOI：10.7506/rlyj1001-8123-201708009
中图分类号：TS207.3 文献标志码：A文章编号：1001-8123（2017）08-0044-05
作为人类重要的营养来源,肉类与人们的生活和健康密切相关,然而在利益驱动下肉制品掺杂、掺假事件时有发生,“挂鹅头卖鸭肉”、非法使用添加剂牛肉膏等食品安全事件不断出现,严重侵害了消费者的权益.肉类来源鉴别的传统方法是依靠感官评价和肉类形态学手段,但这些已远不能满足监管部门对肉制品掺杂、掺假现象的监控,因此加强肉类产品中动物源性成分的检测技术研究意义重大.
随着分子生物学技术的不断发展,以DNA为基础的聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术以其独特的优势被越来越多地应用于畜禽肉源性成分的鉴别,并已逐步成为肉类产品中动物源性成分鉴定的核心方法[1-4].近年来,实时荧光定量PCR技术凭借其特异性良好、自动化程度高、检测周期短以及扩增目的片段较小等优势在动物源性成分鉴别中成为研究热点,极大地提高了动物源性成分定性检测的效率和灵敏度[5-6].林彦星等[7]根据鸭mt DNA Cox基因保守序列设计特异性引物和Taq Man探针,建立了畜禽肉制品中鸭源性成分的荧光定量PCR检测方法.孙晶莹等[8]根据牛线粒体DNA片段设计合成了2 对特异性引物,以生牛肉、熟牛肉和牛肉制品为研究对象,建立了牛肉制品中牛源性成分的多重实时荧光PCR检测方法.荧光定量PCR技术的绝对优势使其能够实现样品的定量检测,并且能够简化实验步骤,可以同时实现对目标片段的定性和定量检测,但由于其灵敏度较高,检测结果易产生假阳性,因此对实验室条件和检验人员的要求较高.
动物线粒体基因组序列具有高度物种特异性、拷贝数多以及在食品加工过程中未完全降解等特点,是进行动物源性成分鉴别的良好靶基因[9-11].近年来陆续报道了一些基于12S rRNA[12]、Cyt b[13]等序列的线粒体基因片段进行肉品中动物源性成分鉴别的方法,但所用到的动物品种相对较少.为进一步完善畜禽肉中鸡源性成分的检测技术,本研究拟选择线粒体DNA COⅠ基因为靶基因,根据羊、牛、猪、兔、鸽、鹌鹑、鸡、鸭、鹅9 种动物COⅠ基因的差异位点设计、筛选鸡特异性引物,建立基于常规PCR和荧光定量PCR技术的畜禽肉中鸡源性成分的快速鉴别方法,为肉制品的掺杂识别提供依据.
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参考文献：
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