论文金线兰组织培养技术是关于对写作组织培养论文范文与课题研究的大学硕士、相关本科毕业论文组织培养的步骤和方法论文开题报告范文和相关文献综述及职称论文参考文献资料下载有帮助。
摘 要 为比较不同的外植体灭菌时间、培养基质等对金线兰离体组织丛生芽诱导、壮苗生根的影响,寻求最适合的培养方法,达到快速获得大量幼苗的目的,特进行了金线兰组织培养技术试验.结果表明,外植体的灭菌时间对诱导成功率有较大影响；QZ（MS+6-BA 10 mg/L+蔗糖30 g/L+椰子汁30 mL/L+琼脂7 g/L,pH值5.5～5.8）培养基较适合金线兰外植体的诱导；SG（添加花宝1号3 g/L+花宝2号0.5 g/L+蛋白胨2 g/L+活性炭0.8 g/L+土豆泥50 g/L+蔗糖20 g/L+琼脂5.5 g/L,pH值5.5～5.8）培养基较适合金线兰的生根培养.
关键词 金线兰；组织培养；外植体
中图分类号 S567.23+9 文獻标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）14-0045-01
Abstract To compare the influences of different explant sterilization time,culture medium on the shoot induction in vitro,rooting and tran-splantation of Anoectochilus roxburghii,find out the most suitable culture method,test was carried out.The results showed that the sterilization time of the explant had a great influence on the induction success rate.The QZ（MS+6 BA 10 mg/L+sucrose 30 g/L+coconut milk 30 mL/L+agar 7 g/L,pH value is 5.5～5.8） culture medium was suitable for the induction of explants of Anoectochilus roxburghii.The SG（Huabaol 0.5 g/L+peptone 2 g/L+activated carbon 0.8 g/L+mashed potato 50 g/L+sucrose 20 g/L+agar 5.5 g/L,pH value is 5.5～5.8） medium was suitable for the rooting culture of Anoectochilus roxburghii.
Key words Anoectochilus roxburghii；tissue culture；explants
金线兰[Anoectochilus roxburghii（Wall.） Lindl.],属兰科作物,别称花叶开唇兰、金钱风、金线莲等.生于海拔50～1 600 m的常绿阔叶林下或沟谷阴湿处,产于中国、日本、泰国、老挝、越南、印度、不丹,尼泊尔、孟加拉国也有分布[1].金线兰氨基酸组成成分含量、抗衰老活性微量元素的含量均高于国产和野生西洋参,是我国传统珍贵药材,素有“金草”“神药”“乌人参”“药王”等美称[2].其全草味甘性平,具有清热凉血、解毒消肿、润肺止咳、祛风利湿等功效,用于咯血、咳嗽痰喘、小便涩痛、消渴、乳糜尿、小儿急惊风、对口疮、心脏病、毒蛇咬伤等.金线兰种子微小,由未成熟的胚及数层种皮细胞构成,自然萌发率和繁殖率低,市场上货源主要来自于野生采挖,产品一直处于供不应求的状况.近年来,随着对其药用价值认识的进一步提高、药效学和临床应用研究的深入,金线兰市场货源紧缺的状况更为严峻,野生资源不断遭到破坏性采挖,以致濒临灭绝.
本研究利用快繁技术,进行金线兰离体组织培养,旨在快速增殖金线兰植株,供市场药用及观赏之途,满足人们不断增长的多种需求,保护其野生种质资源,并实现规模化生产和持续开发利用[3].
本课题选用健康、壮实的金线兰带芽茎段作为外植体,比较不同的外植体灭菌时间、培养基质、有机添加物、激素、培养环境等对其丛生芽诱导、增殖、分化、壮苗生根的影响,寻求最适合的培养方法,达到快速获得大量幼苗的目的.
1 材料和方法
1.1 试验材料
选用健壮、无病虫害的金线兰植株.
1.2 试验方法
1.2.1 外植体灭菌.切取健壮、无病虫害的金线兰植株茎段[4] 6～10 cm带芽,去除叶片叶鞘,用低浓度洗洁精水浸泡4～5 min,自来水冲洗30 min,在超净工作台上用75% 酒精浸泡30 s,放入1% NaClO（每100 mL消毒液加1～2滴吐温20）中消毒7、9、11 min,无菌水冲洗5～6次,置于灭菌滤纸上吸干表面水分待用.
1.2.2 茎段诱导培养.将消毒好的金线兰带芽茎段,切成2～3 cm长,基部向下接入JD（MS+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L,琼脂7 g/L,pH值5.5～5.8）、ZZ（MS+6-BA 5 mg/L+蔗糖30 g/L+椰子汁30 mL/L,琼脂7 g/L,pH值5.5～5.8）、QZ（MS+6-BA 10 mg/L+蔗糖30 g/L+椰子汁30 mL/L+琼脂7 g/L,pH值5.5～5.8）、CM（花宝1号3 g/L+蛋白胨2 g/L+活性炭0.8 g/L+香蕉泥15 g/L+土豆泥50 g/L+蔗糖20 g/L+琼脂5.5 g/L,pH值5.5～5.8）等4种基本诱导培养基[5],每种培养基10瓶,每瓶3个茎段,室温（26±2）℃黑暗培养30 d.
1.2.3 丛芽继代增殖.将诱导成功的金线兰小芽接入ZZ培养基中,置于室温（26±2）℃、光照（2 000 lx）8 h/d环境下培养30 d.
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参考文献：
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