论文新技术在食品微生物检验检测中应用是关于本文可作为微生物方面的大学硕士与本科毕业论文微生物发酵菌论文开题报告范文和职称论文论文写作参考文献下载。
摘 要：现代社会中,随着人们对食品要求的增加,食品安全越来越成为人们关注的焦点,因此寻求、建立快速检测食品微生物的方法十分必要.简要介绍了几种新型的用于快速检验检测食品微生物的技术及其在实际检验检测中的应用.
关键词：食品微生物； 食品检测； 代谢学技术； 分子生物学；质谱技术
中图分类号： Q 939.37 文献标志码： A 文章编号： 10005137（2016）01012106
随着人们生活水平的提高和现代食品业的快速发展,人们对于食品的要求越来越高,食品安全成为人们关注的重点.然而无论是传统的发酵食品,还是现在的新型发酵产品,都在一定方面存在着潜在的危害,每年关于由微生物引起的食品安全问题也层出不穷.2011年,一项关于食源性疾病的主动监测数据显示,我国平均6.5人中就有1人次罹患食源性疾病[1].因此,建立快速检测食品微生物的方法在食品安全监控技术研究领域具有举足轻重的作用.本文作者就目前几种新型的具有良好发展空间的食品微生物快速检测方法及其应用进行了介绍.
1 生理生化技术在食品微生物检测中的应用
生理生化技术（也称代谢学技术）是利用菌体在代谢过程中产生特异物质、分子等变化特性,对菌种进行检测的方法.主要包括ATP发光法、微量生化法等.
1.1 ATP生物发光法
ATP存在于所有活体生物中,因此可以通过测定样品中的ATP浓度检测食品中的活菌数.ATP发光法通过发光光度计检测荧光素酶在ATP的作用下氧化荧光素所产生的荧光强度来检测菌量[2].具有简便、省时、快速等特点,还可以被用于大量食品样本中菌污染情况检测以及食品现场快速检测等.
ATP生物发光法近几年来在食品检测方面主要被用于乳制品中乳酸菌的检测、啤酒中菌落总数的检测、调味品即脱水蔬菜的细菌的测定等等[3].
1.2 微量生化法
微量生化法包含微热量技法、放射测量法等.前者是利用菌在生长过程中产生的热量变化来鉴别菌种；后者是将微量的放射性标记物标记菌中生长所需要的碳水化合物,通过测量菌种生长过程中产生的具有放射性的CO2来测定食品中的菌量.此类方法均具有快速性、准确性较高的优点[4].
除了这两种技术之外,电子阻抗法、接触酶测定技术因其所具有的优势在检测食品细菌方面也得到广泛应用.其中电子阻抗法具有敏感性高、可重复、反应快速等优点而在食品微生物快速检测中应用广泛,目前该方法主要被用于样品中大肠菌群、乳酸菌、酵母菌等[5]的定量检测.
2 分子生物学技术在食品微生物检测中的应用
分子生物学方法早在1996年开始应用于食品微生物的检验检测中[6].该方法是在基因水平上对目标微生物进行检测,尤其是用于难培养或抗原结构复杂的微生物的鉴定和分型,其中主要包括PCR、核酸分子杂交及基因芯片等技术.
2.1 常规PCR技术及其在食品微生物检测中的应用
PCR（polymerase chain reaction）,是由美国的Kary Mullis等人建立的一种用于放大扩增特定的DN 段的分子技术.在20世纪末就以其灵敏度高、目标特异性强、快速等特点,在微生物检测中得到大量应用.现在此方法已经被用于精确地检测和鉴定乳制品中的乳酸菌、双歧杆菌以及酒类中的酵母菌、水源中的大肠杆菌和大肠菌群等[7-9].
2.2 PCR衍生技术在食品微生物检测中的应用
随着各种技术的不断发展,PCR技术开始不断和新技术进行结合,形成一些新的PCR衍生技术,例如：qRTPCR、PCRDGGE、Multiplex PCR、LAMP等.
qRTPCR（实时荧光PCR技术）,最早于2006年被用于食品细菌的检测[10].和常规PCR相比,它具有特异性强、自动化程度高、避免污染等特点.qRTPCR技术近年来已在多种致病细菌、霉菌、酵母以及乳酸菌等重要食品微生物指标的定性和定量检测中被广泛应用[11].张弛等采用多色荧光,建立了同步检测食品中3种致病菌的Taqman多重荧光定量PCR法[12].
PCRDGGE,是将PCR和变性梯度凝胶电泳分析技术相结合的一项技术.理论上只要选择的电泳条件足够精细,有一个碱基差异的DN 段均可被分开[13].PCRDGGE技术具有检测不可培养类的细菌、高检测率、高重复性等优点.现在,PCRDGGE技术主要被应用于发酵类食品[14]、酿酒等食品的微生物检测和群落研究[15].
和常规的PCR相比,Multiplex PCR多被用于食品病原微生物的检验检测.病原性食品菌主要包括沙门氏菌、金 葡萄球菌、单增李斯特菌、副溶血性弧菌等[16-17],除此之外,该技术还被用于乳酸菌等食品非致病菌的检测.
LAMP（环介导等温扩增技术）是2000年新开发的一种核酸扩增技术,在食品细菌、真菌、寄生虫等检测中具有一定的应用[18-19].
除此之外,分子杂交技术在微生物检测中也有一定应用,例如基因杂交技术,主要被用于检测食品中的大肠杆菌、沙门氏菌、金 葡萄球菌等[20]；基因芯片技术,被应用于微生物的快速检测、基因表达、检测基因突变等方面,为食源性疾病的诊断和防治提供了一定的依据[21-22].
3 免疫学检测技术在食品微生物检测中的应用
免疫学检测技术是一类基于抗原—抗体特异性反应而形成的检测方法,主要作用对象为目标微生物的某个特异基因的表达产物.
3.1 免疫磁性微球技术
免疫磁珠（IMB）是近几年发展起来的一项新型免疫学检测技术.该技术将固化试剂特有的优点和免疫学反应的高度特异性结合于一体,此外还具有高效、快速、可重复性好、操作简单和费用低等优点.
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参考文献：
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