论文湖北广水萝卜病毒病的分子鉴定和防治是关于本文可作为病毒病方面的大学硕士与本科毕业论文病毒病论文开题报告范文和职称论文论文写作参考文献下载。
摘 要：病毒病是萝卜生产上的主要病害之一,在湖北广水地区大面积发生,为有效防治萝】、病毒病,提高农民经济效益,对湖北广水地区萝卜花叶病毒病进行了调查和病毒种类的鉴定,并提出了具体的防治措施,即选择抗病萝卜品种、适期晚播、避免连作、加强苗期管理和药剂防治相结合.
关键词：萝卜；病毒病；发生；防治措施
中图分类号：S63I.1；S436.31
文献标识码：A
文章编号：1001-3547 （2015）08-0061-02
病毒病是萝卜（Raphanus sativus L.）生产上的主要病害之一.萝卜病毒病日趋严重,特别是夏秋季节为害更大,主要症状是轻重不等的花叶、黄点花叶、扭曲皱缩、矮化和坏死,最严重的全株死亡.据Ahlawat等报道,萝卜病毒病使肉质根减产30.3%-100%,种子减产37.2%-95.8%.2014年10月湖北广水市长岭镇近133 hm2萝卜发生花叶病毒病,调查发现该主产区白玉春、美侬、天鸿春、汉白玉、雪单1号等8个主栽品种均发病,病情指数21-65（表1）.但在播种期和栽培条件基本相同的情况下,不同品种间的发病率有明显差异,四月白、汉白玉、春不老发病率高,病情指数高；雪单1号、天鸿春发病较轻.
萝卜病毒病的传毒介体主要是蚜虫.2014年10月以来,由于湖北广水地区的长期高温干旱,蚜虫繁殖快,产生大量有翅蚜,有翅蚜在田间往返迁飞,进行试探性取食,将病毒在萝卜植株间相互传播,引发该地区萝卜病毒病的大面积发生.
1 病毒种类分子鉴定
1.1 试验材料
田间随机选择生长基本正常、无虫害、具典型花叶症状的萝卜植株30份,每份50-300g.采集的萝卜植株病害症状为黄绿相间不规则的嵌纹和条斑,长短大小不同,布满整个叶片,发病程度为严重、一般、轻微和隐症.同时对病样采集地点无症状表现的植株也进行叶片样品采集.
1.2 试验方法
去除样品表面的尘土和生物污染,放入保鲜袋运回实验室,-80℃冰箱保存.根据相关文献和基因库中病毒的基因组序列,以CP、MP、Nib、ORFI、OR-FII核苷酸序列作为靶标,设计了鉴定病毒的多对特异引物,包括8种RNA病毒、3种DNA病毒以马铃薯Y病毒科（Potyviridae）的通用引物.DNA、RNA提取参照王洪星等的方法.根据引物说明,设置不同退火温度和PCR反应程序,对疑似萝卜病毒病样品进行PCR/RT-PCR检测.
2 结果与分析
以提取的DNA为模板,分别采取3对DNA病毒引物进行PCR扩增,结果显示,均没有扩增条带；以设计的RNA病毒引物进行RT-PCR扩增,结果表明,所检测的萝卜样品中,黄瓜花叶病毒（CMV）所扩出的CP基因长度为764 bp,芜菁花叶病毒（TuMV）所扩出的CP基因长度为333 bp,蚕豆萎蔫病毒（BBWV）所扩出的多聚蛋白基因长度为1656 bp（图1）.试验结果表明,蚕豆萎蔫病毒是为害萝卜的主要病毒：约有1/4的样本是由2种或2种以上的病毒复合侵染,复合侵染病株中的病毒主要是蚕豆萎蔫病毒、芜菁花叶病毒和黄瓜花叶病毒.
3 防治建议
①选择抗（耐）病毒病萝卜品种,如武青1号、鲁萝卜2号、春萝1号、京红1号、红丰2号、衡阳半节红、豫萝卜1号等.
②适期晚播,避开高温干旱敏感期.
③避免与十字花科蔬菜连作、邻作.
④加强苗期管理,如精细整地、播种,氮、磷、钾肥配合施用,及时浇水,浇、锄结合等,促进幼苗健壮,减轻病害.苗期做好蚜虫、黄曲条跳甲、蓟马、虱防治工作,干旱年份缩短蹲苗期,及时中耕除草,拔除病弱苗.
⑤药剂防治可使用20%吗啉胍·乙铜500倍液、0.5%抗毒剂l号水剂300倍液、1.5%植病灵乳油1000倍液等药剂喷雾,每隔5-7 d喷1次,连续2-3次.采收前Sd停止用药.
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参考文献：
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