论文黑龙江省烟草角斑病菌菌系分化是关于烟草方面的的相关大学硕士和相关本科毕业论文以及相关烟草论文开题报告范文和职称论文写作参考文献资料下载。
摘 要：为明确黑龙江省烟草角斑病菌生理小种的遗传分化,本试验将在黑龙江省主要烟区采集到的19个烟草角斑病菌菌株通过针刺接种法接种到36个供试烟草品种上,通过对供试烟草品种病情指数的差异性分析和聚类分析,筛选了一套鉴定烟草野火病菌生理小种的鉴别寄主体系,利用这套鉴别寄主将19个供试菌株划分为5个生理小种.
关键词：烟草；角斑病；生理小种；遗传分化
中图分类号：S572.08 文章编号：1007-5119（2014）03-0046-04 DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2014.03.010
Abstract： To identify the heredity differentiation of physiologic races of Heilongjiang Pseudomonas syringae pv. tabaci, total 19 isolates of Pseudomonas syringae pv. tabaci collected from Heilongjiang province were inoculated onto 36 tobacco varieties using pin-prick inoculation. Differential host was screened out by difference analysis and cluster analysis on disease index to determine the resistance of the varieties tested, which was selected to identify different physiologic races of Pseudomonas syringae pv.tabaci. According to the above system, the 19 isolates were divided as 5 physiologic races.
Keywords： tobacco； angle spot； physiological race； genetic differentiation
烟草角斑病在世界各地均有发生,是烟草产区普遍发生的病害之一,由丁香假单胞杆菌角斑专化型Pseudomonas syringae pv. Angulata（Fromeetal）Holland侵染引起.近些年来,由于生产上单一感病品种的连片种植,给烟草角斑病的流行创造了良好的条件,使该病害逐年加重,特别是黑龙江、辽宁等省发病最为严重,个别烟区发病率高达100%,已严重威胁部分烟区烟叶生产的发展[1-2].利用抗病品种是最经济、安全、有效的方法.而目前生产上的植烟品种对该病害的抗性都较差,甚至是严重感病[3],又没有安全有效的化学手段防治该病害,一旦发病,便束手无策.因此选育适合的抗病品种尤为重要,为育出具有针对性的、抗性强的广谱抗病品种,就必须掌握当地病原菌株的种群分布及遗传分化情况[1,4].笔者对黑龙江省烟草角斑病菌菌系分化现象进行了深入研究,以期为监测黑龙江省角斑病菌种群动态,合理优化品种布局、选育广谱抗病品种及烟草角斑病的综合防治提供科学依据.
1 材料与方法
1.1 供试品种
供试烟草品种包括国外引进品种,国内外种植1.2 供试菌株
供试菌株于2012年采自黑龙江省15个主产烟区的烟草角斑病病叶,经平板划线法分离、多次单菌落纯化并鉴定后得到19个菌株,菌株保存在KBA斜面备用,并置于75%甘油溶液中,-70 ℃长期保存[5].2013年试验前在超净工作台无菌操作环境下将各菌株分别接到LB液体培养基中置于26 ℃摇床中振荡培养24 h,转速200 r/min.再将活化后的菌株重新进行平板划线分离和单菌落纯化,作为供试菌株待接种用,各菌株见表2.
1.3 人工接种
试验于2013年在牡丹江烟草科学研究所试验基地（宁安市范家乡）进行.
1.3.1 田间试验设计 将19个供试菌株分别接种到36个供试烟草品种上.每个品种接种3株烟,每株烟接种在第8～12片叶上,并设1个对照（不接种病原菌）.重重4次,随机区组试验设计.
1.3.2 菌悬液的配制 将上述供试菌株转至LB液体培养基中,28 ℃培养18～24 h,经灭菌水稀释后,配制成3×108～5×108 cfu/mL菌悬液,以供接种.2 结 果
2.1 烟草品种抗病性及菌种致病性差异比较
对接种后的试验结果进行方差分析（表4）表明,供试烟草品种间、菌株间的差异极显著,说明供试烟草品种对烟草角斑病的抗病性表现以及菌株间的致病力表现存在显著差异.同一烟草品种对不同菌株的抗病力不同,同一菌株对不同烟草品种的致病力也不同,证明烟草角斑病病菌存在遗传分化现象.3 讨 论
目前国内外对烟草角斑病菌生理小种遗传分化现象的研究还未见报道,烟草角斑病菌生理小种的划分在国际上还是空白[6].本研究是采集19个烟草角斑病菌菌株,通过其对36个供试烟草品种致病力重复表现差异进行聚类分析所得出的结论,能较为真实的反映黑龙江省烟草角斑病菌的致病力分化.但对病害生理小种的划分需要大量的病原菌进行多次重复试验,因此还需继续扩大菌株数量进行多次重复验证.
本试验采集的19个烟草角斑病菌菌株来自黑龙江省15个烤烟产区,其中有同一个产区的角斑病菌菌株被划分为同一个生理小种,也有同一个产区的角斑病菌菌株被划分为不同的生理小种,这种现象在自然界植物与病原菌的互作中普遍存在,病原菌的繁殖速度快,个体微小,与外界环境的接触面积大,可在短时间内产生大量的变异后代,并且容易受到环境条件的影响而发生变异.寄主植物和病原物在自然界中能够长期共存,得益于两者之间不断的相互选择和相互适应而协同进化,正是这种协同进化产生了寄主植物的抗病性不同和病原物的致病力不同,进而产生了病原物株系的分化,同一烟区的烤烟和角斑病菌之间的协同进化速率不同,而产生了不同致病力的角斑病菌,因此同一烟区采集来的角斑病菌被划分为不同的生理小种是有可能存在的.近几年,黑龙江省正逐步更换烤烟品种,再加上面积较大的烟区有着不同的气候条件和土壤条件,也进一步导致了角斑病菌的生理小种在同一烟区出现了分化.本试验旨在明确黑龙江省烟草角斑病菌的生理小种分化,因此在省内的同一烟区采集的角斑病菌较少,要想明确一个烟区的病原菌的生理小种组成,还需在这个烟区大量采集病原菌,选择合适的鉴别寄主,进行详细的生理小种鉴定试验,这是笔者下一步的工作.
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参考文献：
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