论文脱毒马铃薯试管苗无菌安全接种技术是关于对不知道怎么写脱毒马铃薯论文范文课题研究的大学硕士、相关本科毕业论文脱毒马铃薯种子公司论文开题报告范文和文献综述及职称论文的作为参考文献资料下载。
摘 要 结合多年脱毒马铃薯试管苗繁育实践工作经验,总结出一套无菌安全接种技术规程,包括接种准备、接（转）苗、接种完毕后收尾,不但做到了接种安全有序、试管苗污染率低,而且效率高、操作快速、管理规范.
关键词 脱毒马铃薯；试管苗；无菌；接种技术
中图分类号 S532 文献标识码 B 文章编号 1007-5739（2018）01-0095-01
自国家实施马铃薯主粮化战略以来,马铃薯在农业生产中的地位日益凸显,其市场需求量呈高增长态势.传统的马铃薯生产多以母薯无性繁殖为主,这种繁殖方式不但生长周期长,无法满足现代工厂化育苗的需求,而且容易受病毒侵染造成种性退化[1].脱毒马铃薯的生产和推广应用对提高马铃薯的生产水平、促进马铃薯产业的快速发展具有重要作用.
在多年的脱毒马铃薯试管苗繁育过程中,总结出了一套脱毒马铃薯试管苗无菌安全接种技术规程,不但做到了接种安全有序、试管苗污染率低,而且操作快速、管理规范,效果非常明显.
1 接种准备工作
接种准备工作包括以下几项：①接种室提前用甲醛和高锰酸钾熏蒸消毒（每1 m3用40%甲醛10 mL倒入装有高锰酸钾5 g的容器内）；并强制过滤通风[2].②用香皂或洗手液将手洗净,更换工作服、鞋、防尘帽、口罩.用75%酒精或0.5%苯酚对超净工作台喷雾降尘消毒,接通超净工作台电源,打开电源开关、风机,打开紫外灯照射15～30 min[3].③准备好消毒灭菌药物、接种用苗、接种培养基、接种工具、酒精灯（在超净工作台外用漏斗添加酒精至1/2～2/3）.④关闭紫外灯,打开照明灯.⑤用75%酒精消毒双手、用75%酒精棉（棉球不能太大、酒精不能太多）擦拭超净工作台的台面和侧壁以及放在超净工作台中的所有器具,将棉球及时移出超净工作台,稍后点燃酒精灯[4].⑥将镊子、剪刀、解剖刀等接种用器具在酒精灯火焰外焰上（不能太靠近酒精灯灯芯）进行灼烧灭菌,从头至尾过火数遍,然后反复过火尖端处（不得少于5 s）,摆放好让其自然冷却.⑦将灭好菌的无菌滤纸在超净工作台外褪去外包装袋,在超净工作台上小心地打开包装报纸,用灭过菌的镊子将无菌滤纸取出放在离风窗10～20 cm处,不可太往外.去除第1张滤纸.将接种镊子进行再次灼烧灭菌,然后摆放好冷却待用.
2 接（转）苗
2.1 取苗
在酒精灯火焰上前方打开培养瓶的瓶盖/封口膜,瓶口对准酒精灯火焰外焰旋烤7～10 s,然后开始取苗,将取出的苗子放在无菌滤纸上.
取苗时,瓶口不要斜向外；如果不能一次取出其内的全部材料,要先把封口膜（瓶盖）对着风源放在酒精灯的左前方,取苗后及时盖上.
2.2 切苗
用镊子和剪刀将植物材料在灭好菌的无菌滤纸上进行剪切,要求快速准确.将苗子切成带1～2个叶片和腋芽的节段接种于培養基上[5],在操作过程中,剪刀和镊子都要在无菌滤纸斜上方操作,不可在其正上方操作.
2.3 接苗
在酒精灯火焰上前方打开培养瓶的瓶盖（封口膜）,封口膜放在酒精灯的左前方,将瓶口对准酒精灯火焰外焰旋烤7～10 s,烤完瓶口后,在酒精灯火焰前上方用镊子将接种材料接种到新的培养基上,接完后瓶口对准酒精灯火焰外焰再次旋烤,然后及时封上封口膜[6].接苗时,镊子最好不要和瓶口接触；组培苗在瓶内要排放整齐、均匀、美观.注意：①接种过程中动作要小心谨慎,以防将酒精瓶或酒精灯碰倒碰翻；严禁将棉球点燃后置于酒精灯或酒精瓶下及附近；用后的棉球要及时移出超净工作台；严禁将有明火或过烫的接种工具放入酒精瓶.万一发生意外,应及时用灭火器扑灭[7].②转接苗时,双手不能离开超净工作台,接种过程中不宜说话、出大气、咳嗽；③接种过程中手不能经过滤纸上方；接种工具不能移出超净工作台.④接种过程中要随时对手进行消毒,镊子和接种刀要随时灼烧灭菌并冷却待用,不可太热；⑤每接完1瓶要换1次滤纸,对接种工具消1次毒.⑥接种后要及时标记,把品种代号、培养基类型、接种日期、个人编号标示到瓶上.
3 接种完毕后收尾工作
一是用酒精灯帽盖灭酒精灯,严禁用嘴吹灭.二是把接种过程中产生的垃圾清理掉,把工作台收拾干净,台上的物品摆放整齐.三是关闭风机、照明灯、电源开关,断开电源.四是将瓶苗整齐有序地摆放在培养架上.五是将垃圾及其他物品带出接种室.六是做好接种工作记录.
4 参考文献
[1] 吴玥琳,凌永胜,林金秀.马铃薯脱毒试管苗组织培养技术概述[J].农业科技通讯,2017（8）：238-241.
[2] 孟长军.组培实验室常见消毒方法优劣比较[J].中国园艺文摘,2012（8）：177-179.
[3] 秦晓萍.马铃薯脱毒苗组培快繁技术[J].中国种业,2015（4）：81-83.
[4] 朱广廉.植物组织培养中的外植体灭菌[J].植物生理学通讯,1996,32（6）：444-449.
[5] 赵佐敏,艾勇.马铃薯组培脱毒试管苗繁育技术[J].中国马铃薯,2003,17（5）：301-304.
[6] 辛国斌.脱毒马铃薯实验室扩繁技术的改进和应用[J].中国马铃薯,2002,16（4）：239-240.
[7] 刘进平,莫饶,吴繁花.组培工厂及植物组织培养实验室的安全管理[J].农业和技术,2005,25（1）：125-129.
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参考文献：
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